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類器官模型因其能夠再現(xiàn)真實組織的復(fù)雜性而在生物研究和篩選中越來越受歡迎,。為了模擬體內(nèi)的人體肺器官,，我們在有助于 3D 結(jié)構(gòu)形成的條件下培養(yǎng)了原代人肺上皮細(xì)胞，重現(xiàn)了肺氣道形態(tài)和功能上的特征,。在肺類器官 培養(yǎng)中,，上皮干細(xì)胞和祖細(xì)胞在添加了一系列生長因子的 ECM 中培養(yǎng)。類器官隨后生長成復(fù)雜的結(jié)構(gòu),，保留了多系上皮細(xì)胞簇,。這些特性使類器官培養(yǎng)成為一種富有前景的手段，可以廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)和轉(zhuǎn)化方法,，如藥物篩 選和疾病建模,。 這里我們闡述了一種高內(nèi)涵成像方法，可以監(jiān)測和可視化肺類器官的生長和分化,，3D 結(jié)構(gòu)的重建,，類器官結(jié)構(gòu)的復(fù)雜分析，細(xì)胞形態(tài)和活力,，以及不同細(xì)胞標(biāo)記物的表達(dá),。3D 肺類器官植入在 Matrigel domes。發(fā)育中的類 器官包括具有復(fù)雜形態(tài)的球形物體,，包括腔和膀胱結(jié)構(gòu),。在 8 周的生長過程中，我們監(jiān)測到了大小和復(fù)雜性的增加,。用透射光監(jiān)測類器官,，然后用 20-30 層 Z 軸掃描透過基質(zhì)凝膠對染色的類器官成像，物鏡倍數(shù)為 10 – 40x,。使用 ImageXpress® Confocal HT.ai 智能化共聚焦高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)新配置的激光光源顯著的提高照明強度,，從而顯著提高了亮度、檢測靈敏度和成像速度,。

• 智能化共聚焦高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)

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